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仔猪复方中草药饲料添加剂的抑菌与急性毒理学
摘 要：依据单味中草药对仔猪规模化养殖常见病原菌的抑菌效果和饲喂效果,结合中医药理论,配制出2剂中草药复方制剂,研究2剂中草药复方制剂的体外抑菌效果和急性毒理试验,以期为仔猪复方中草药饲料添加剂的研制提供抑菌和毒理研究.结果表明,配制的2剂中草药复方制剂都有较好的抑菌和杀菌效果,并且都为无毒产品.
关键词：“止泻散”；中草药；饲料添加剂；抑菌；毒理学
基金项目：淮安市重点研发计划（现代农业）计划,编号：HAN201609；江苏食品药品职业技术学院面上引导基金项目,编号：JSSP2015020
中图分类号：S828.5 文献标识码：A DOI 编号： 10.14025/j.cnki.jlny.2018.23.037
仔猪断奶时容易产生腹泻、营养不良,进而影响仔猪生长性能,长期使用抗菌药和激素的滥用,产生了细菌耐药性增加、环境污染等一系列问题,严重威胁规模化猪场的健康养殖和人类健康[1].以我国产量丰富的中草药为原料研制饲料添加剂,代替抗生素防治仔猪腹泻,具有抗病促生长显著效果、作用方式独特、无有害残留、不易产生抗药性等优点[2].
1 材料
1.1 中草药复方制剂
根据单味中草药的抑菌效果和病原菌种类,结合中医药理论,配制出2 剂“止泻散”仔猪复方中草药饲料添加剂.
1.2 试验动物
试验动物为昆明种小白鼠,体重为18～22g,用常规方式饲养,自由采食.购于扬州大学.
2 方法
2.1 抑菌试验方法
2.1.1 药敏性试验采用牛津杯加注药液的体外抑菌法.将12cm 灭菌培养皿分成6 个扇区.中草药及复方的醇提物按照同样的方法进行体外抑菌试验[3].
2.1.2 最小抑菌浓度(MIC) 和最小杀菌浓度(MBC) 的测定依据水提物、醇提物抑菌结果,采用10 倍稀释法及2 倍稀释法,测定MIC 和MBC.
10 倍稀释法：用无菌营养肉汤倍比稀释药液（终体积5mL）,37℃培养24h.以不显示浊度、细菌未生长时的药物浓度作为MIC,并取该管中0.05mL 肉汤,接种于营养琼脂平板；37℃培养24h,平板上无菌落或菌落生长数≤10 的药物浓度为MBC[3].
2 倍稀释法：根据10 倍稀释法结果,进一步确定MIC 和MBC,MIC 和MBC 判定同10 倍稀释法[3].
2.2 急性毒性试验（LD50 的测定）
根据此前预试验结果,设20000mg/kg,29000mg/kg,42050mg/kg 和60973mg/kg4 个剂量组（等比级数1.45）和一个空白对照组.取18～22g 小白鼠,每组10 只,雌雄各半,连续给药7d,每天观察小白鼠精神、食欲、饮水、活动及中毒情况,并记录小白鼠的死亡数目[4].
2.3 数据统计分析
试验值以平均数&plun;标准差表示,并采用SPSS17.0 进行单因素方差分析.
3 结果与分析
3.1 抑菌试验结果
3.1.1 中草药复方制剂水提物对6 种相关病原菌的抑菌直径
3.1.2 中草药复方制剂水提物对6 种病原菌的MIC 和MBC由表1 和表2,抑菌直径、最小抑菌浓度和最小杀菌浓度分析可知,根据单味中草药的抑菌效果和病原菌种类,结合中医药理论,配制的2 剂中草药复方制剂都有较好的抑菌和杀菌效果,并且复方制剂与单味中草药相比抑菌和杀菌效果均优于单味中草药.
3.2 毒理学试验结果
经7d 观察,全部小白鼠的精神、食欲、饮水等情况和对照组比较均无异常.据此确定小白鼠灌服中草药饲料60973mg/kg 后,仍没有出现中毒死亡.按毒理学评价标准,可不必测定半数致死量（LD50）,即LD50>60973mg/kg.结果表明,中草药饲料添加剂属于实际无毒类物质.
4 结论
据抑菌直径、最小抑菌浓度和最小杀菌浓度分析可知,依据单味中草药的抑菌效果和病原菌种类,结合中医药理论,配制的2 剂中草药复方制剂都有较好的抑菌和杀菌效果,并且复方制剂抑菌和杀菌效果均优于单味中草药.
急性毒理学试验、蓄积毒性试验结果显示,复方中草药饲料添加剂是一种无毒副作用的纯天然的绿色药物.
参考文献
[1]黄美州,刘永明,王慧,等.仔猪腹泻病原学研究进展[J].动物医学进展,2015(03):88-91.
[2]刘云宁,李小凤,班旭霞,等.中药抑菌成分及其抑菌机制的研究进展[J].环球中医药,2015(08):1012-1017.
[3]向双云,周珍辉,李玉冰,等.8 种中草药对大肠杆菌的体外抑菌试验[J].黑龙江畜牧兽医,2016(10)：167-169.
[4]李玉奎,赵爱侠,赵琳,等.复方乌头微乳皮肤刺激性和急性毒性实验研究[J].世界中医药,2017(04)：861-863.
作者简介：杨猛,硕士,副教授,研究方向：生物药物.
毒理学论文范文结:
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1、毒理学杂志