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鸭病毒性肝炎的诊断和防治措施
摘 要鸭病毒性肝炎是由鸭甲型肝炎病毒引起的一种急性、烈性、高度接触性传染病,由于病毒血清型较多,且易发生变异而难以有效地免疫预防,导致该病一直成为危害养鸭业健康发展的重要疾病.本文就引起鸭病毒性肝炎的病原、流行病学、临床症状、病理特征以及防治措施等方面进行综述,以期为临床鸭病毒性肝炎的诊断与防控提供参考.
关键词鸭病毒性肝炎诊断防治
文献标识码：A
文章编号：1003-4331(2017)03-0016-03
鸭病毒性肝炎（D uck ViralH epatitis,DVH）是由鸭甲型肝炎病毒（D uck H epatitisA Virus,DH）引起的一种急性、高度接触性传染病.该病以发病急、传播快、死亡率高为特征,主要感染3周龄以内的雏鸭,成年鸭也可感染,但不发病.
根据基因差异,病毒可分为DH-1（A型）、DH-2（B型）和DH-3(C型)三种不同的血清型.DH-1即为传统的DHV血清1型：DH-2目前仅在我国台湾地区有报道,也称之为台湾型：DH-3首次在韩国报道,也称韩国型,但近年来在我国也陆续有报道[2-3].目前,我国主要流行DH1和DH-3．但DH-1亦出现新的致病型（或亚型）,因此,给临床诊断及防控带来较大困难[4-5].
当前各地主要采用接种疫苗的方法来预防DH感染,由于其存在多个血清型,且各血清型间交叉保护率低,即使在免疫良好的情况下,鸭群依然受到来自不同型DH的威胁.另外,雏鸭感染DH后,传播快、病程短、死亡率高的特点,使养鸭场一旦感染该病,必然损失惨重.因此,当前该病依然严重威胁着养鸭业的健康发展.本文从DVH的病原、流行病学、临床症状、病理特征以及防治措施等方面进行综述,以期为临床养殖户防控该病提供科学依据.
1流行病学
DVH由Levine等于1945年首次在美国报道,并用鸡胚在5年后分离鉴定出该病原为DHV-1．即现在的DH-1(A型)；之后在加拿大、英国、德国、意大利等诸多国家均有该病的报道,目前己呈世界性分布.国内黄均健于1963首次报道在上海某鸭场有DVH的发生,随后诸多地区相继有该病的报道,现我国大部分地区均有发生.DH感染宿主包括鸭（番鸭、半番鸭、北京鸭、樱桃谷鸭）、鹅和鸽等[7-8].鸭为该病的主要侵害对象,尤以3周龄以内雏鸭为最,其感染后死亡率可高达80%以上：10日龄以内的雏鸭感染后死亡率高达90%’100%：随着日龄增大,感染后死亡率降低．4周龄以上很少发病,成年鸭也可隐性感染,但不发病.感染后雏鸭3d开始发病．5d死亡率可高达80%．1周后则基本不出现死亡.
该病毒主要通过与患鸭直接接触后发生传播,也可通过病原污染的饲料、饮水和用具等常规方式传播,消化道为最主要的感染途径,也有研究表明呼吸道在感染过程中同样起很重要的作用,但不经卵传播.病毒感染性极强,雏鸭一旦感染,传播速度快、死亡率高.成年鸭虽不发病,也不影响产蛋率,但会长期排毒.研究表明,感染后康复鸭,排毒可持续1´2个月阴：自然条件下,该病毒不感染鸡和火鸡.
该病无明显季节性,一年四季均可发生,但在孵化季节发病率会明显增加.雏鸭发病率可达100%．1周龄雏鸭发病率可达95%．1～3周龄病死率为50%左右,4～5周龄发病率低,基本不发生死亡.
2病原
DH属于小RNA病毒科(Picorniridae),肠道病毒属(En teroviurs)成员.病毒粒子呈球形或类球形,大小为20～40 nm,无囊膜.核衣壳为二十面体对称结构,含32个壳粒.病毒不能凝集任何动物的红细胞,也不具有红细胞吸附特性.可通过鸡胚、鸭胚和鹅胚传代增殖.病毒对、碳氟化物等大多数有机溶剂具有较强的抵抗力：对热有一定的耐受作用．56℃作用1 h后仍有活性．62℃作用30 min方可灭活；可耐受pH 3.0的酸性环境.自然环境中,病毒能在污染的鸭舍内存活10周左右,在阴凉的粪尿中可存活37 d以上：在4℃环境中,可以存活2年以上：-20℃条件下则可存活长达9年.
3临床症状
雏鸭感染后发病迅速,初期精神沉郁、厌食,软弱无力、匍伏、低头、眼半闭,呈昏睡状态；随后全身抽搐,身体侧翻,脖子上仰,头向背部弯曲,濒死时双脚呈划水样：死亡后雏鸭呈典型的“角弓反张”现象.部分可见排灰白色或绿色水样粪便.雏鸭感染该病后潜伏期短,通常在感染后3～4 d内、或出现症状后1 h左右发生死亡.临床上以病程短、发病急、传播快、死亡率高为主要特征.
4病理变化
经典的DVH以肝脏的病变为主,表现为肝脏肿大、质脆易碎,表面有出血点或出血斑.肾脏肿大,切面凸起,表面血管充血,胆囊膨大,胆汁呈现褐色、淡绿色或淡茶色.脾脏肿大、出血.脑膜充血、水肿.另外,有时也可见心肌、胸腺、法氏囊、脑等器官呈现肿胀、出血或坏死性等症状.近期．傅光华等报道,DH-1出现新的致病型（或亚型）．主要表现为胰腺泛黄,肝脏病变则不明显,相关致病机制有待进一步阐明.
5诊断
DVH主要发生在3周龄以内雏鸭,根据上述临床特征症状及主要剖检病变,可作初步判断.实验室针对DH的诊断方法主要有：病毒中和试验(VNT)、琼脂扩散试验(AGP)、酶联免疫吸附试验（E LISA）、RT-PCR技术、免疫组化(IH C)等.VNT是检测DH最经典的方法,该方法检测结果准确可靠,是目前公认的权威方法；但其操作繁杂,费时、费力、成本高,不利于快速诊断.AGP简单快速,但其特异性和灵敏性不足,并且该方法对抗原、抗体要求较为严格.国内外学者对DH抗原或抗体的ELISA检测方法做了大量研究,该方法可分为间接ELISA、D ot-E LISA和双抗体夹心ELSn等,因其快速、准确、廉价且适合批量检测的优点而备受推广.RT-PCR同样具有较高的敏感性和特异性,可快速、准确地从多种样品（组织、粪便、血液等）中将病毒检测出来.目前针对DH．实验室常用ELlSA和RT-PCR作为检测方法.
6防治措施
DVH感染雏鸭后发病急、传播快、死亡率高,对于该病的防控,主要以疫苗和高免抗体为主,但也有报道称某些中草药具有抵抗DH的作用.目前,国内外针对该病的防控做了大量研究,主要通过以下几种手段.
6.1弱毒疫苗DH可在鸡胚或鸭胚上连续传代,在一定代次内,可使病毒毒力逐渐减弱而免疫原性保持不变.利用该特点,可将DH用鸡胚或鸭胚连续传代而制成弱毒疫苗株.A spli( 1954)和R euss(1959)均通过鸡胚传代致弱的方式,获得了DVH弱毒疫苗株.Hwang等(19 71)发现,将DH1通过鸡胚连续传至63代后获得的弱毒疫苗株具有良好的免疫活性,肌肉注射3d后即可抵抗DH-1强毒的攻击.国内,程安春、张小过、罗薇、郑献进、张阿娥等分别研制了DH-1鸡胚化弱毒疫苗株A66株、CH 60株、MY株、E63株和VPY70株,其中A66株和CH 60株己获国家新兽药证书.
有关DH-3．韩国学者Kin等利用临床分离的DH-3(AP-04203)株,通过SPF鸡胚连续传至100代而获得弱毒疫苗株A P-0420l00,且证实该疫苗株安全、毒力不反强、免疫原性好,以0.2 mL( 103.OE LD50)肌肉注射免疫1日龄雏鸭2d后,可对强毒株产生100%保护效果.国内,苏敬良等将DH-3 B株经鸭胚连续传至53代后再以雏鸭传至10代,试验证明,该传代致弱株无毒力反强现象.免疫攻毒保护试验结果显示．DH-3 B株54代弱毒株以5xl05.9E LD so剂量颈部皮下接种雏鸭5d后,可对强毒的攻击产生100%的保护.表明该弱毒株免疫原性好、毒力稳定,可作为国内DH-3疫苗候选株阴.谢小雨等以DH-3 Y株用SPF鸡胚连续传至第80代后,发现其对1日龄雏鸭己无致病性,且免疫攻毒保护试验显示,该鸡胚传代致弱株肌肉注射免疫1日龄雏鸭7d后,对强毒的保护指数为100%.
6.2灭活疫苗DH灭活疫苗指将临床分离鉴定且具有免疫原性的DH直接接种健康雏鸭、禽胚或细胞后,收集致死雏鸭的肝组织或致死的禽胚组织（或细胞）作为制苗材料,将收集后材料进行物理或化学方法灭活处理,再以不完全弗氏佐剂、白油或蜂胶等为佐剂而制成的疫苗.G ough等将病毒感染后致死的鸭胚组织,采用I3丙烯内酯灭活后配与不完全弗氏佐剂进行乳化,最早制成了DH-1灭活苗.且该研究表明,仅以灭活苗为基础免疫无法产生满意的抗体,但免疫3次后的种鸭,其后代雏鸭可获得有效的保护.国内,胡建华等将DH-1接种11日龄鸡胚后获得的尿囊液（ELD so≥l0-8.O/mL）,与吐温80、司本80、硬脂酸铝和白油一起制成油包水型油佐剂灭活疫苗.结果显示,免疫1日龄雏鸭7d后,其攻毒保护率高达100%．且免疫期为1个月以上.陈克强等以DH-1上海分离株接种9日龄鸡胚后的死亡胚组织,制成雏鸭DH-1蜂胶灭活苗.通过实验室和临床试验初步表明,该灭活苗对雏鸭具有良好的安全性和免疫原性,按0.5 m L/羽剂量肌注7d后,攻毒保护率可达85.70%．保护指数为82.10%.
6.3高免抗体 高免抗体可分为高免血清和高免卵黄抗体.高免血清最早被使用,其效果较好,但制作过程复杂、产量少、成本高,且易污染,当前临床上较少使用.卵黄抗体指通过免疫产蛋鸡,然后在其生产的蛋黄中提取相应的抗体,之后用于相应疾病的预防和治疗.因其制作简便、经济实惠,现己成为治疗DH的重要手段.如王平等(1980)使用高免血清和高免卵黄抗体成功控制了北京地区的DVH.此外,在高免抗体的使用中,需选择与流行株血清型相对应的抗体,
6.4其他研究表明,抗病毒中药能直接杀伤病毒,同时刺激机体免疫系统产生细胞因子,通过免疫细胞识别并吞噬病毒.中药因其成本低、毒副作用小、不易产生耐药性等特点,而被广泛运用于DVH的防治.国内学者对抗DH中药复方制剂、中药单体等进行了大量的探索.周广生等研制了复方蟾酥制剂,且证明该制剂比西药金刚烷胺效果好,可用于预防和治疗DVH.另外,研究结果显示,刘立云等研制的茵蒲清肝散、孙欲光等筛选的复方中药“鸭肝宁”口服液和毕玉霞等筛选的参灵清瘟败血口服液,同样对DVH具有很好的防治效果.而某些中药单体,如芦荟、水飞蓟素和金丝桃素等,对DH的感染也具有一定的治疗作用.
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