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干化学酶法在炎诊断中的应用价值

摘 要:目的:探讨干化学酶法检测在炎临床诊断中的应用价值.方法:对8000例患者的分泌物同时进行常规手工镜检和干化学酶法检测,对结果进行对比分析.结果:以显微镜检查法为“标准”,干化学酶法对乳酸杆菌分析的敏感性为85%,特异性为91%,阴性预测值为80.3%,阳性预测值为93.3%;对白细胞分析的敏感性为80%,特异性为93%,阴性预测值为71.4%,阳性预测值为95.5%;对BV诊断的敏感性为84%,特异性为90%,阴性预测值为96.5%,阳性预测值为62.3%;对念珠菌分析的敏感性80%,特异性为85%,阴性预测值为96.0%,阳性预测值为48.6%;对滴虫分析的敏感性88%,特异性为88%,阴性预测值为99.8%),阳性预测值为7.8%.结论:干化学酶法作为一种快速简便的炎过筛方法,对分泌物中的病原菌检查是有帮助的,与标准方法比较敏感性特异性较好.

关键词:炎;干化学酶法;诊断;敏感性;特异性

分泌物常规检查是妇科常见的一种检查,通过的PH值,清洁度,微生物等检查来判断女性健康情况,是一项有关女性生理卫生的身体检查.正常情况下,内以杆菌为主,还有少量厌氧菌等,这些菌群形成了一种生态平衡.但当人体免疫力低下,内分泌激素发生改变或外来因素如组织损失,破坏了的生态平衡时,这些常住菌群会变成致病菌,冲破屏障而引起感染.大部分患者无明显临床症状或临床症状较轻,起病缓慢,自觉症状不明显,其主要临床表现为外阴灼热感、瘙痒,鱼腥臭味的白带[1].这些疾病主要根据分泌物成分做出判断,而分泌物检查常规主要依赖实验室的人工显微镜检查,这方法操作较繁琐,对人员的要求高.近年来,基于干化学酶法的研究成果—炎五联检,结合pH,可间接反映分泌物中乳酸杆菌、白细胞、厌氧菌、念珠菌和滴虫等的状况.但该法能否作为各种炎传统手工检验方法的的替代方法,还有待进一步论证.为此,我们对干化学酶法炎五联检与常规镜检法检测分泌物的结果进行比较 现报告如下.

1 材料与方法

1.1 研究对象与材料 2011年1月~2012年12月间在我院门诊就诊患者,共8000例,年龄19~60岁.用无菌拭子收集的患者后穹窿分泌物.

1.2 检测试剂和仪器 炎五联检试剂盒(郑州安图绿科生物工程有限公司),OLYMPUS显微镜.

1.3 方法

1.3.1 镜检方法 以常规镜检法作为金标准.分泌物涂湿片,显微镜下观察清洁度、乳酸杆菌、白细胞、线索细胞、滴虫、念珠菌,并通过革兰染色进行确认.

1.3.2 干化学酶法炎五联检试剂盒购自郑州安图绿科公司,同时检测过氧化氢、白细胞酯酶、唾液酸苷酶、脯氨酸氨基肽酶和乙酰氨基葡萄糖苷酶等5项指标.实验操作严格按说明书进行.

1.4 判定标准

1.4.1 显微镜镜检判定标准.结果按以下标准进行判读:乳酸杆菌,革兰阳性长杆菌< 6个/HP为阴性,革兰阳性长杆菌≥6个/HP为阳性;白细胞,≥15个/HP 为阳性,< 15个/HP为阴性;细菌性炎( BV),每视野线索细胞<20%为阴性,≥20%为阳性;念珠菌,随机镜检10个高倍镜视野,未见念珠菌孢子或菌丝为阴性,有念珠菌孢子及或菌丝为阳性;滴虫,随机镜检10个高倍镜视野,未见滴虫为阴性,有滴虫为阳性[3].

1.4.2 干化学酶法五联检方法判定标准.按说明书提供的判定标准进行结果判读.具体为,正常:所有指标均阴性;BV:唾液酸苷酶阳性和( 或) 脯氨酸氨基肽酶阳性,乙酰氨基葡萄糖苷酶阴性;念珠菌性病:pH≤4.6,乙酰氨基葡萄糖苷酶阳性;滴虫性病:pH≥4.8,乙酰氨基葡萄糖苷酶阳性.细菌性念珠菌或滴虫性以外的炎:过氧化氢阳性,白细胞酯酶阳性.

1.5 统计学分析 采用诊断阴性预测值、阳性预测值、诊断敏感性和诊断特异性.

2 结 果

2.1 干化学酶法与手工镜检法检测乳酸杆菌的结果分析 与手工镜检法比较,过氧化氢酶法对乳酸杆菌的检测敏感度为85%(4065/4781),特异性91%(2929/3219),阴性预测值为80.3%(2929/3646),阳性预测值为93.3%(4065/4354).见表1.

2.5干化学酶法与手工镜检法检测毛滴虫的结果分析与手工镜检法比较,乙酰氨基葡萄糖苷酶联合PH值对毛滴虫的检测敏感度为85%(4065/4781),特异性91%(2929/3219),阴性预测值为99.8%(6960/6971),阳性预测值为7.8%(80/1029).见表5.

3 讨 论

分泌物称白带是女性正常的分泌物,它是由前庭大腺、子宫颈腺体、子宫内膜的分泌物和粘膜的渗出液、脱落的上皮细胞混合而成.白带常规检查是妇科常见的一种检查,通过的PH值,清洁度,微生物等检查来判断女性健康情况,是一项有关女性生理卫生的身体检查[4-6].正常情况下,内以乳酸杆菌为主,还有少量厌氧菌及其它寄生菌等,这些菌群形成了一种生态平衡.当感染等因素打破这种菌群平衡,菌群之间的互相制约作用消失,乳酸杆菌失去优势从而氢离子减少使得pH升高,病理菌得以繁殖,就产生症状[5-7].

育龄妇女是炎发病最常见的人群,主要通过实验室显微镜检查分泌物的检查发现其相关成分改变或量的改变而诊断.但该技术操作比较繁琐,对检验人员技术要求高,不容易统一规范.目前推出的炎五联检技术,而其所使用的原理是干化学酶法.该法不需镜检,操作简便快速.其主要通过检测过氧化氢浓度、白细胞酯酶活性、唾液酸苷酶活性、脯氨酸氨基肽酶和氨基葡萄糖苷酶活性等成分改变来判断分泌物里的病原菌.本文以显微镜检查法为标准,干化学酶法对乳酸杆菌分析的敏感性为85%,特异性为91%;对白细胞分析的敏感性为80%,特异性为93%;对BV诊断的敏感性为84%,特异性为90%;对念珠菌分析的敏感性80%,特异性为85%,对滴虫分析的敏感性88%,特异性为88%;与夏东[8]报道的特异性相近.干化学酶法作为一种方法,若以其作为过筛标准,乳酸杆菌、念珠菌和滴虫的敏感性分别为85%、80%和88%,会漏掉部分阳性.实验发现血性标本会干扰干化学酶法的检测,就是所有的结果必须排除干扰,必须经过人工辅助判别后,才能与传统的显微镜检查结果相符合.如果不加辅助判别,实验结果的敏感性和特异性将会明显降低.

本文的干化学酶法阳性预测值的结果显示,毛滴虫阳性预测值为7.8%,念珠菌阳性预测值为48.6%,细菌性病(BV)阳性预测值为62.3%,白细胞阳性预测值为95.5%.提示妇女炎发病的病因以线索细胞及念珠菌感染为主,毛滴虫引起发病的机率在减少.

综上所述,干化学酶法具有操作简便易于掌握,耗时短,结果直观,试剂可室温保存等优点,但其作为过筛方法需要与传统显微镜结果相结合,该法敏感性特异性较好值得进一步推广.

参考文献:

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[2] 熊立凡,刘成玉. 临床检验基础[M]. 4 版. 北京:人民卫生出版社,2008:249.

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[6] Riggs MA,Klebanoff MA.Treatment of vaginal infections to prevent prelerm birth:a meta-analysis.Clin Obslet Gynecol.2004,47(4):796-807.

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[8] 夏东,王成浩,苏倩,等.干化学酶法检测分泌物诊断炎的价值[J].山东医药,2014,54(29):59-61.

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