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用稳定性粉状二氧化氯防治鱼类水霉病的实验
二氧化氯（ClO2）是对病毒、细菌、真菌等各种微生物具有极强杀灭能力的卤素类制剂.与其他卤素类制剂相比,ClO2不仅对各种微生物的杀灭力更强,而且通过氧化分解完成其杀灭微生物过程后的生成物是水、氯化钠、微量CO2和有机物,无有害残留物和致癌物质.所以,自从ClO2问世以来,已经被广泛地用于医疗卫生防疫、食品加工业、油井解堵和畜、禽活动场所等的消毒.
鱼类的水霉病(Saprolegnisis)是由多种水生真菌引起的一种常见继发性疾病.过去用于防治该病的主要药物是孔雀石绿和甲醛等.然而,已经有研究结果表明,孔雀石绿和甲醛对动物的细胞均具有致畸变作用.因此,寻求既安全又能有效地防治水产动物水霉病的药物,是一个具有现实意义的课题.卢次勇等（2000）的实验结果表明,ClO2对须发癣菌和红色毛癣菌等皮肤真菌有很好的杀灭效果.为了证实ClO2是否对由水生真菌引起的鱼类真菌病具有防治效果,特进行本实验.
一、材料与方法
1.供试药物及其原液的配制
用于本实验的稳定性粉状ClO2由河南省新乡市康大消毒剂有限公司生产.生产批号为001208,含量为6.6%.临用前打开包装袋并准确称取10.0g稳定性粉状ClO2溶解于100.0 mL蒸馏水中,摇匀,即为稳定性ClO2的供试原液.
2.供试鱼及其处理
本实验的供试鱼为取自华中农业大学水产站饲养池的鲫（Carassiusauratus）鱼种和泥鳅（Misgurnusa n g u i l l i c a n d a t u s ） , 在每个8 6 c m × 5 3 c m × 5 0 c m 的塑料水族箱中盛装30.0L经充分嚗气去氯后的自来水,于每个水族箱内放养10尾鲫或者20尾泥鳅.驯养7天后,逐尾检查供试鱼,淘汰活动异常和有外伤的鱼体,将活动正常而无外伤鲫的尾柄两侧用解剖刀刮去部分鳞片和用纱布擦拭泥鳅尾部数次,即人为制造创伤后,放回水族箱中充气饲养.实验期间不投喂饵料,控制水温（20&plun;1）℃.
3.水霉菌来源及人工感染的方式
从华中农业大学水产站饲养池中收集1 0 尾寄生有大量多子水霉（Saprolegnia ferax）的鲢（Hypophthalmichthys molitrix）,置于盛有20.0L养殖池水的塑料水族箱中,待其死亡后继续放置2天,以使水霉菌进一步生长.用解剖刀刮下体表的外菌丝并切下水霉菌寄生处的部分肌肉,磨碎后连同刮下的水霉菌丝一起倒回盛有养殖池水的水族箱中,作为人工感染用的水霉菌液.向上述每个饲养有供试鱼的水族箱中加入4.0L水霉菌液,对供试鱼进行水霉病的人工感染.
4.用药量及用药程序
对不同的水族箱,分别于加入水霉菌液后的0h,24h和48h时,定量加入稳定性ClO2原液,使饲养水中稳定性ClO2的终浓度分别达到20mg/L,30mg/L,40mg/L和50mg/L.搅动水体,使药液均匀地分布在水中.另外设置不添加药液的水族箱作对照组.
5.防治效果的判定
在人工感染水霉菌结束后14天内,每天观察记录水族箱中鱼体的活动和创伤部位的水霉菌的着生状况.根据供试鱼体上水霉菌丝的寄生状况,并结合供试鱼的死亡数量,判断稳定性ClO2防治鱼类水霉病的效果.
二、结果
1.对鲫人工感染水霉菌后稳定性ClO2的防治效果
以不同的用药量和用药程序施用稳定性ClO2时,在14天的实验观察期内,实验和对照供试鲫体表水霉菌的着生状况和死鱼数量如表1所示.由表1可以看出,在供试鱼接触水霉菌之前就用药的实验组感染率和死亡率均比较低,而当鱼体接触水霉菌24h和48h后再用药时,其感染率和死亡率均有明显上升.
2.对泥鳅人工感染水霉菌后稳定性ClO2的防治效果
以泥鳅作实验鱼的实验结果如表2所示.由表2可以看出,以不同的用药量和用药程序施用稳定性ClO2时,在14天的实验观察期内,实验和对照组供试泥鳅的感染率和死亡率趋势与用鲫进行的实验结果基本相同.即供试鱼未接触水霉菌之前的用药组,稳定性ClO2对鱼类水霉病的防治效果最好,随着感染时间的延长,防治效果虽然有下降的趋势.但是,与对照组相比,仍然显示出了明显的防治效果.
三、讨论
1.稳定性ClO2对鱼类水霉病的预防效果
向水族箱中加入水霉菌液后,立即添加稳定性ClO2药液的试验组（即0h试验组）,由于水霉菌的孢子尚未萌发菌丝而寄生在供试鱼体上,因此,可视为稳定性ClO2对水霉病的预防效果.根据本实验结果,表明稳定性ClO2对水霉菌的孢子有较好的杀灭作用,将其用于养殖水体消毒,可以有效地降低受伤鱼体感染水霉菌的比例和减少因水霉菌的寄生而引起的死亡数量.但是,本实验结果也同时表明了在供试鲫和泥鳅中,还是有一部分鱼体感染了水霉甚至出现了死亡,这是否因为处于不同萌发阶段的水霉菌孢子对稳定性ClO2存在不同的感受性或者是本实验中使用的药物浓度偏低的缘故,尚有待进一步研究.
2.稳定性ClO2对鱼类水霉病的治疗效果
使供试鱼与水霉菌液接触48h和96h后,再添加稳定性ClO2药液的试验组（即48h和96h试验组）,因为在用药前水霉菌孢子有可能已经寄生到鱼体受伤部位,因此,可视为稳定性ClO2对水霉病的治疗效果.根据本实验结果,已经初步证明了稳定性ClO2对鱼类的水霉病有一定的治疗作用.对感染水霉菌24h后用药的治疗效果优于48h后用药的实验组,这一实验结果表明采用稳定性ClO2治疗鱼类早期的水霉病是可行的.
本实验已经证明了稳定性ClO2对水体中和寄生在鱼体上的水霉菌孢子和菌丝有杀灭作用,而关于最佳用药浓度与程序以及稳定性ClO2杀灭水霉菌的机理等,则需要深入研究.
四、结论
孔雀石绿作为一种化工常用原料、试剂,现在不可能禁止其生产.因为其低廉、对某些水产病害如水霉病等的确具有特效的特点,现实中尚有少数水产养殖业者在使用这种药物.但是,孔雀石绿潜在的毒副作用是不容忽视的,管理部门除加大宣传力度、加强监管、建议养殖从业者自觉使用较为安全的渔场杀虫和杀菌剂外,还需要鼓励渔药生产企业尽快研究出替代孔雀石绿的药物.根据我们采用稳定性二氧化氯做的试验,预防水霉病具有比较好的效果,而治疗疾病尚有一定的困难.
作者单位：1.华中农业大学教育部农业微生物重点开放实验室
2.河南省新乡市康大消毒剂有限公司
实验研究论文范文结:
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2、实验论文格式
3、大学物理实验期刊
5、教育和实验杂志